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基因组DNA污染清除试剂(清除RNA样品中的DNA污染)
货号:R1140  |  规格:50ml  |  品牌:Applygen
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描述:制备RNA时基因组DNA污染将会干扰下游PCRNorthern Blot实验。用RNase-freeDNase消化DNA也会导致RNA降解。基因组DNA污染清除试剂不含DNA酶,在强烈抑制RNA酶的同时彻底清除RNA样品中的DNA和蛋白质污染,进一步纯化RNA。最后通过乙醇沉淀回收得到RNA纯度极高,完全不影响原有RNA质量和下游应用。

用途:非酶法清除RNA样品中的基因组DNA污染。每ml试剂处理~100μg RNA样品。

组成:50ml 基因组DNA污染清除剂100次。

储存:4℃避光储存 12个月有效

效果展示:


图:DNA污染清除试剂效果


新鲜大鼠肌肉组织总RNA的普通琼脂糖凝胶电泳。

Before:清除前

在提取RNA时故意吸取较多的含基因组DNA成分,并向最终的RNA样品中加入少量大鼠基因组DNA

After:清除后

使用DNA污染清除试剂之后,彻底清除RNA样品中的污染DNA

使用方法

根据起始RNA溶液的体积,按比例加入所需试剂。以下操作以100μl RNA溶液为例。除非RNA溶液中RNA浓度很低,为方便操作可用高压灭菌过的蒸馏水将不足100μlRNA样品的体积补充到100 μl

1. 100μl RNA溶液加入500μl基因组DNA污染清除试剂。充分混匀,冰育1分钟。

2. 加入自备的氯仿100μl。充分混匀,冰上孵育1分钟。

3. 12000rpm低温离心10分钟。

4. 取上清约300 μl转移到新管。应留下少量上清勿触动含DNA的中间相,否则重新离心。

5. 2-2.5倍上清体积的无水乙醇,充分混匀,冰上或-20C孵育20分钟。如果取出上清液量较多,此步骤可加入0.6-1倍上清液体积的异丙醇沉淀。

6. 12000rpm低温离心10分钟。弃上清。

7. 500μl 70%乙醇,振荡洗涤沉淀。12000rpm低温离心10分钟。弃尽上清。

8. 敞开管口,空气干燥RNA沉淀。

9. 加入适量自备的蒸馏水或缓冲液溶解RNA沉淀。1% 普通琼脂糖凝胶电泳检查RNA

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