|
|
|
|
■ 制品内容
|
产品名称
|
3735A/3736A
|
3737A
|
3738A
|
3739A
|
3735S/3736S
|
3737S
|
CellAmp Washing Buffer*1
|
2.5 ml×5
|
2.5 ml×5
|
2.5 ml×5
|
-
|
2.5 ml
|
2.5 ml
|
CellAmp Lysis Buffer II*1
|
1 ml×5
|
1 ml×5
|
1 ml×5
|
-
|
1 ml
|
1 ml
|
DNase I for Direct RNA Prep*1
|
200 μl
|
200 μl
|
200 μl
|
-
|
40 μl
|
40 μl
|
Stop Solution*1
|
250 μl
|
250 μl
|
250 μl
|
-
|
50 μl
|
50 μl
|
PrimeScript RT Enzyme Mix*2
|
200 μl
|
200 μl
|
-
|
200 μl
|
40 μl
|
40 μl
|
5X CellAmp Buffer II*2
|
400 μl
|
400 μl
|
-
|
400 μl
|
80 μl
|
80 μl
|
RT Primer Mix*2、3
|
100 μl
|
100 μl
|
-
|
100 μl
|
20 μl
|
20 μl
|
RNase Free H2O*2
|
1 ml×2
|
1 ml×2
|
-
|
1 ml×2
|
1 ml
|
1 ml
|
TB Green Fast qPCR Mix (2X) (3735A/S)*4
或Probe qPCR Mix (2X) (3736A/S)*4
|
625 μl×10
|
-
|
-
|
-
|
625 μl×2
|
-
|
ROX Reference Dye (50X)*4
|
250 μl
|
-
|
-
|
-
|
50 μl
|
-
|
ROX Reference Dye II (50X)*4
|
250 μl
|
-
|
-
|
-
|
50 μl
|
-
|
|
|
*1 Cell Lysis用试剂 3735A/3736A/3737A/3738A 100 次量 3735S/3736S/3737S 20 次量
*2 RT(反转录)试剂 3735A/3736A/3737A/3738A 100 次量 3735S/3736S/3737S 20 次量
*1 和*2 使用不够时,可另行购买:
· CellAmp Direct Lysis and RT set(Code No. 3737S/A):*1 和*2 的试剂
· CellAmp Direct Lysis set(Code No. 3738A):*1 的试剂
· CellAmp Direct RT Enzyme set(Code No. 3739A): *2 的试剂
*3 包含Oligo dT Primer和Random 6 mers
*4 qPCR试剂 3735A/3736A 500 次量 3735S/3736S 100 次量
■ 制品说明
CellAmp Direct RT-qPCR Kit是无需对96孔板或者其他板上培养的各种动物细胞进行RNA提取(cell line化的贴壁细胞和悬浮细胞、原代培养细胞、各种干细胞、iPS细胞等),只需简单的操作就可以进行两步法Real Time RT-PCR的试剂盒。使用该试剂盒,从培养细胞起始,最短仅需1.5小时便可以完成从模板制备到反转录反应及基因表达分析等操作。此外,该试剂盒能够有效去除基因组DNA,对于有基因组DNA混入而出现问题的解析(难于设计包含exon junction的引物,分析基因表达量低的样品等)可以很好的发挥作用。TB Green检测及probe检测用两步法Real Time RT-PCR试剂也包含在此试剂盒中,因此无需另行准备,即可轻松地进行基因表达分析。
*试剂盒中的qPCR试剂与以下产品相同,使用不够时请另行购买
使用3735A/B时: TB Green Fast qPCR Mix (Code No. RR430S/A/B)
使用3736A/B时: Probe qPCR Mix (Code No. RR391S/A/B)
■ 保存
-20℃。
CellAmp Washing Buffer 和 CellAmp Lysis Buffer II
融解后置于4℃保存,注意防止污染。
3735S/A:TB Green Fast qPCR Mix(2X)
4℃可稳定保存6个月。避光保存,避免污染。
长期保存时请于-20℃保存。TB Green Fast qPCR Mix(2X)融解后可4℃保存,于6个月内使用完。
使用时要完全融解且颠倒混匀。
3736S/A:Probe qPCR Mix(2X)
4℃可稳定保存6个月。避免污染。
长期保存时请于-20℃保存。Probe qPCR Mix(2X)融解后可4℃保存,于6个月内使用完。
使用时要完全融解且颠倒混匀。
■ 使用注意
以下为使用本试剂盒时的注意事项,使用前一定认真阅读。
1. 细胞裂解液的制备要迅速,不要停滞。
2. 分装试剂时要使用一次性枪头避免样品之间的污染。
3. RNA操作时的注意事项
· 市售的灭菌一次性Tube通常认为是RNase free的产品,可直接用于实验,Microtube和微量移液器使用的枪头需要灭菌处理后再使用。
· 玻璃器具、匙等使用前需要160℃干热灭菌至少2小时以上。对于无法干热灭菌的耗材,使用0.1%的DEPC水在37℃处理12小时,然后高压灭菌。用于RNA实验的器具请与其他类实验用的器具分开存放。
· 样品制备的过程中还需要其他防污染措施,包括使用无菌一次性手套以及口罩等防止汗液及唾液造成的污染。