■ 制品内容 (40 次量) 
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Random Primer (9 mer)
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80 μl
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10 × Buffer
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100 μl
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dNTP Mixture
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100 μl
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(dGTP,dATP,dTTP) (各0.2 mM)
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BcaBEST® DNA Polymerase (2 U/μl)
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40 μl
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Control DNA (λ-Hind Ⅲ Fragment) (25 ng/μl)
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10 μl
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■ 制品说明
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BcaBEST® Labeling Kit是一种在DNA上标记[α-32P]、[3H] dCTP后，可在短时间内合成DNA 探针的试剂盒。本试剂盒的设计以A.P.Feinberg和B.Vogelstion 法为基础并对其进行了改良，操作十分简便，合成后的探针比活性高。目前我们经常使用的Klenow fragment 存在反应时间长、对GC 含量高的DNA 模板或具有高级结构的DNA 摄入效率低等缺点。Bacillus caldotenax 来源的BcaBEST® DNA Polymerase是一种耐热性的、高延伸性的DNA 聚合酶。BcaBEST® DNA Polymerase 和随机引物 (9 mer) 在50℃～ 55℃条件下反应10 分钟，即可对具有高级结构的DNA 模板进行标记。
BcaBEST® DNA Polymerase 具有优良的延伸性，与Klenow fragment相比，可以合成更长的探针，同时因BcaBEST® DNA Polymerase不具备exonuclease活性，反应时间长也不会导致摄入效率下降。
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表1. 与Random Primer DNA Labeling Kit Ver.2比较
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BcaBEST® Labeling Kit
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Random Primer DNA Labeling Kit Ver.2
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反应时间
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10分钟
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10分钟
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探针的比放射活性
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～109 dpm/μg
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～109 dpm/μg
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模板DNA
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不受高级结构、GC含量的影响
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高级结构或GC含量高时可导致摄入效率下降
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注：两种试剂盒使用300 bp以下的DNA模板时，可导致摄入效率下降。
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■ 利用随机引物进行DNA标记的原理
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