■ 制品内容
GenTLE Yeast Solution A*1,2 15 ml
GenTLE Yeast Solution B*3 3 ml
GenTLE Yeast Solution C 6 ml
TE Buffer 6 ml
* 1 GenTLE Yeast Solution A中含有酵母细胞破壁酶,避免剧烈震荡或其他不正当操作使酶失活。
* 2 据报道,GenTLE Yeast Solution A中作为酵母细胞破壁酶的Zymolyase-100T含有少量真菌DNA*。
*:Jpn. J. Med. Mycol . (2009), 50, No. 4, 259-262
* 3 如果GenTLE Yeast Solution B出现沉淀,可于37℃温浴使其完全溶解后使用。
■ 制品说明
Dr. GenTLE (from Yeast) High Recovery是一种可以从酵母菌中高效抽提、精制基因组DNA的试剂盒。本试剂盒主要利用酵母菌破壁酶以及盐析法进行酵母菌DNA的提取。通过离心收集酵母菌细胞,加入GenTLE Yeast Solution A (含酵母细胞破壁酶Zymolyase-100T) 消化细胞壁,然后加入GenTLE Yeast Solution B使细胞裂解,添加GenTLE Yeast Solution C盐析、离心去除裂解液中的蛋白质等杂质,最后通过异丙醇沉淀获得酵母基因组DNA。
使用本试剂盒提取的酵母基因组DNA适合于大部分基因工程实验,如Southern blotting、PCR反应、限制酶消化等。适用酵母菌种如下表A和B所示。本试剂盒可以从1~2×108过夜培养的酵母菌中纯化得到4~10 μg较为完整的 (35~200 kb) 酵母菌基因组DNA。
使用Dr. GenTLE (from Yeast) High Recovery可提取DNA的酵母菌种(属)一览表
A
|
能够提取DNA的酵母菌
菌种
|
Ashbya,Candida,Debaryomyces,Endomyces,
Eremothecium, Hanseniaspora,Hansenula,
Kloeckera,Kluyveromyces,Lipomyces,Metschikowia,
Pullularia Saccharomyces,Saccharomycopsis,
Saccharomycodes,Schizosaccharomyces,
Selenozyma,Trigonopsis,Wickerhamia
|
B
|
能够提取,但个别株(Strain)提取困难的
酵母菌菌种
|
Bretanomyces,Cryptococcus,Nadsonia,Pichia,
Rodosporidium,Schwanniomyces,Stephnoascus,
Torulopsis
|
C
|
提取困难的酵母菌
菌种
|
Bullera,Pityrosporum,Rhosotorula,Sporidiobolus,Sporobolomyces,Stetigmatomyces,Trichosporon
|
■ 保存
4℃。GenTLE Yeast Solution B可以在室温保存。如果在低温保存后出现沉淀,可于37℃温浴使其完全溶解后使用。
■ 实验操作流程图