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MiniBEST Whole Blood Genomic DNA Extraction Kit
货号：9781  |  规格：50 Rxns  |  品牌：Takara
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说明
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商品详情
■ 制品内容 (50 次量)
本试剂盒分Part I 与 Part II两部分。
□ Part I -20℃保存
Proteinase K (20 mg/ml)                                         1 ml
RNase A (10 mg/ml)                                                500 μl
 
□ Part II 室温 (15-25℃) 保存  
10×Buffer RCL A*1                                                  2 ml × 2
10×Buffer RCL B*2                                                 16 ml
Buffer GB*3                                                              12 ml
Buffer WA*3                                                             28 ml
Buffer WB*4                                                             24 ml
Elution Buffer                                                          14 ml
Spin Columns                                                          50 支
Collection tubes                                                      50 支
*1和*2使用前按照1:4的比例混合，得到10×Buffer RCL (红细胞裂解液) 。该10×Buffer RCL可以现用现配或在首次使用时将*1全部倒在*2的试剂瓶中，于4℃可保存1年。
*3含有强变性剂，应避免与皮肤、衣物等接触。若不小心接触到眼睛或皮肤时，请立即到医院进行处理。
*4在首次使用前，请添加56 ml的100%乙醇，混合均匀。
 
■ 制品说明
本试剂盒用于从1 μl～1 ml加入各种抗凝剂的无核红细胞 (如哺乳动物) 全血中提取基因组DNA，或从加入各种抗凝剂总体积不超过10 μl的有核红细胞 (如鸟类、鱼类) 全血中提取基因组DNA。试剂盒采用了特别的红细胞裂解方法裂解全血中的大量无核红细胞，再由细胞裂解液裂解白细胞并释放基因组DNA，再结合DNA制备膜技术纯化基因组DNA。本试剂盒具有高效、快速、方便之特点，整个提取操作过程仅需1个小时便可获得高纯度的基因组DNA。提取得到的基因组DNA可用于PCR反应、Southern杂交以及RAPD、AFLP、RFLP等多种分子生物学实验。
 
■ 保存与运输
1. 本试剂盒分两部分保存和运输，Part I请在-20℃保存和运输；Part II在室温下 (15-25℃) 保存和运输。
2. 10×Buffer RCL A，10×Buffer RCL B可于室温下保存，按比例混合后的10×Buffer RCL可于4℃保存1年，客户可根据实际使用情况决定保存方式。
 

■ 实验操作流程图



 
■ 注意事项
1. 应尽量使用新鲜全血，避免反复冻融，以确保提取的基因组DNA的收量及完整性。
2. 血液样品的保存：
① 短期保存：已加入抗凝剂的血液样品可在2～8℃保存最多10天，对于某些实验，例如Southern杂交等，需要得到完整全长的基因组DNA，将血液样品在2～8℃保存请不要超过3天。
② 长期保存：已加入抗凝剂的血液请置于-70℃保存，血液样品应尽量避免反复冻融。
3. 部分试剂中含刺激性化合物，操作时请戴上乳胶手套和眼镜，避免沾染皮肤和眼睛等，并应尽量在通风橱中进行操作。若沾染皮肤、眼睛，要立即用大量清水冲洗，必要时应寻求医疗咨询。
4. 基因组DNA需长期保存时，建议用Elution Buffer洗脱。
5. 标准实验操作适用于人全血材料，其他哺乳动物全血操作基本相同。只是在裂解红细胞时不尽相同，例如马血等材料需要多次处理，才可使红细胞裂解充分 (红细胞膜较厚) ；而一些小型的动物可能需要减少裂解时间和次数。
6. 离心时切不可使用过大的离心力，否则白细胞将会破损，而无法正常悬浮。
7. 10×Buffer RCL是由10×Buffer RCL A和10×Buffer RCL B按照1:4比例混合配制得到，可以现配现用，也可以在首次使用时将10×Buffer RCL A和10×Buffer RCL B全部混在一起，然后保存在4℃，可以保存一年以上。
8. 在使用前一定要确认待提取全血的红细胞是否有核，如果为红细胞有核的全血，若起始量超过10 μl则可能造成Spin Column堵塞。
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