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TaKaRa MidiBEST Endo-free Plasmid Purification Kit
货号:9783S  |  规格:10 Rxns  |  品牌:Takara
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说明
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制品内容 (25 次量)
本试剂盒分试剂Set与Column Set两部分。
试剂Set
RNase A(10 mg/ml)                 1.1 ml × 2
Buffer P1                                               220 ml
Buffer P2*1                                          220 ml
Buffer P3*2                                          220 ml
Buffer PB                                              420 ml
Buffer PW1                                          960 ml
Buffer PW2                                          850 ml
Buffer PE                                             140 ml
Endo-free H2O for 70% EtOH*3   30 ml
Endo-free H2O                                   30 ml
Endo-free TE                                      30 ml
*1 含有强碱溶液,应避免与皮肤、衣物等接触。若不小心接触到眼睛或皮肤时,请立即到医院进行处理。
*2 含有强变性剂,应避免与皮肤、衣物等接触。若不小心接触到眼睛或皮肤时,请立即到医院进行处理。
*3 首次使用前,向Endo-free H2O for 70% EtOH中添加70 ml的100%乙醇。
 
Column Set
MidiEF DNA Column(包含预装的Column Filter) 25 支
Plastic Washer* 10 枚
* Plastic Washer请重复使用。
 
【试剂盒之外所需准备试剂】
·无水乙醇
·异丙醇
 
制品说明
本试剂盒是用于从培养细菌中提取各种无内毒素质粒(plasmid、cosmid)的中量纯化试剂盒。试剂盒采用了传统的SDS碱裂解法,结合阴离子交换树脂和特殊的buffer组合,可以有效去除内毒素,具有高效、快速、方便之特点。使用本试剂盒可从100 ml LB培养基过夜培养菌液中纯化得到200 μg的高纯度无内毒素质粒DNA(OD260/OD280=1.8~2.0,内毒素含量<0.1 EU/μg)。使用本试剂盒提取的质粒DNA溶解于Endotoxin-free TE或Endotoxin-free H2O中,纯度高,可直接用于转化、转染、限制酶切等分子生物学实验。
 
保存与运输
1. 本试剂盒可以在室温下(15-25℃)保存,但温度较低时,有的Buffer会出现沉淀,使用前需37℃加热直至沉淀消失。
2. Buffer P1中加入RNase A后可于4℃保存6个月
3. RNase A可于室温下(15-25℃)保存6个月,长期保存需存放于-20℃。
4. 本试剂盒于室温下(15-25℃)运输。
 
使用注意
1. 初次使用本试剂盒时,请将RNase A混浊液全部加入到Buffer P1中,均匀混合后4℃保存,可稳定保存6个月。若6个月内不能全部使用完,建议不要全部混合,可依每次需要用量按照Buffer P1:RNase A(10 mg/ml)= 100:1的比例单独混合使用。
2. 首次使用前,向Endo-free H2O for 70% EtOH中添加70 ml的100%乙醇。
3. 检查Buffer P2和Buffer P3中是否有沉淀,如果有沉淀请将试剂置于37℃温浴直至沉淀全部消失,不可剧烈振荡Buffer P2,以免产生大量气泡。
4. Buffer P2使用后,应立即盖紧盖子,避免试剂长时间与空气接触。
5. Buffer P3使用前请于4℃预冷。
6. 试剂中含有强碱及变性剂,操作时应佩戴手套等防护用具。
7. 提取过程中所使用的离心管、移液管、吸头须无热原或无内毒素,玻璃器皿须经180℃过夜处理。
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