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SMARTer PCR cDNA Synthesis Kit
货号:634925  |  规格:10次  |  品牌:Clontech
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SMART即RNA模板5'末端的转换机制,该技术在cDNA第一链合成的过程中,巧妙且高效地将一段已知序列加入到合成的cDNA两端,不需要adaptor连接。这段已知序列的存在对于下游应用包括扩增、RACE和文库构建等很关键。通过多种技术来利用这些已知序列的同时,一步法SMART技术的简便性和高效性保证了很高的灵敏度,并生成和扩增全长cDNA。
 
微量的RNA样本操作
整个SMART流程是在一个tube中的单酶反应。仅需对珍贵的RNA样本做很少的处理,可有效降低潜在的降解风险。这个用户友好型的流程是简单直接的,无需adaptor连接、加尾、中间过程纯化等操作。
 
全长cDNA富集
由于cDNA合成容易受到模板RNA二级结构的影响,传统方法合成的cDNA,基因5'端通常未能全部存在保留。而SMART cDNA合成过程中,由于反转录提前终止而生成的缩短了的产物,无法与SMARTer oligonucleotide结合的,在PCR过程中无法被扩增。所以,使用SMART技术结合长距离PCR合成扩增的cDNA,是被富集的全长cDNA。此外,由于5' SMARTer序列和修饰的oligo dT引物不会添加到基因组DNA和核糖体RNA转录的cDNA上,所以SMART技术合成的cDNA是不含有这些污染因素的。
 
高灵敏度、高效率
与传统的方法如adaptor连接方法相比,SMART技术优势之一,就是其具有更高的效率。SMART技术高效率和高灵敏度的特点,使SMART技术尤其适用于起始材料有限的情况,如显微切割组织、激光捕获细胞、活组织切片样本等。低至1-2 ng的total RNA已足够生成高度代表性的cDNA库用于各种下游应用。
 
单步操作
SMARTer 第一链cDNA合成过程中,已知通用引物序列已经添加到了cDNA两端。第一链合成后,SMARTer cDNA可以直接用于下游PCR应用。
 
■ 特点
·total RNA起始量可以低至1-2 ng
·特异性富集全长cDNA
·优化的流程以保留真实的基因表达
·简单的操作,无需DNase处理或单独的adaptor连接步骤
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