■ 制品内容(Code No. 2480A)
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Faustovirus Capping Enzyme(S17) (25 U/μl)
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500 U
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10× Capping Buffer 2
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100 μl
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S-adenosylmethionine (SAM) (32 mM)
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100 μl
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GTP (10 mM)
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50 μl
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■ 制品说明
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Faustovirus Capping Enzyme (S17)是一种来自Faustovirus S17菌株的单亚基酶,它在RNA的5’端(5’-三磷酸RNA)添加7-甲基鸟苷酸结构 (Cap 0) ,其作用方式与Vaccinia Capping Enzyme的作用类似。在真核生物中,帽结构对于mRNA的稳定、出核转运以及翻译起到重要作用。该酶与本制品中附带试剂(10X Capping Buffer 2, S-adenosylmethionine (SAM), GTP)一起使用,可以在体外高效合成具有完整Cap 0结构的RNA。本酶也可以与mRNA Cap 2’-O-Methyltransferase(Code No. 2470A/B)同时使用,一步反应高效地在RNA 5’末端紧邻帽结构(Cap 0)的第一个核苷酸的 2’-O上添加甲基基团,制备具有Cap-1结构的RNA。
此外,与Vaccinia Capping Enzyme相比,该酶在更广泛的温度范围(30-50℃)内具有活性,并且在处理各种靶标RNA时更通用,因此可用于疫苗等RNA医药领域的研究开发。
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■ 用途
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1. Cap-0 mRNA的制备
2. 与mRNA Cap 2'-O- Methyltransferase联合制备Cap-1 mRNA
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■ 保存
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-20℃
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■ 来源
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Escherichia coli carrying a plasmid containing the gene for Faustovirus capping enzyme (S17)
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■ 性质
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分子量:约100 kDa
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■ 活性定义
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在37℃下30分钟内将5 pmol的100 nt转录产物转化为Cap-0 RNA所需的酶量定义为1个活性单位(U)。
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■ 使用注意
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1. 混匀时,不要剧烈振荡;
2. 如果试剂、试管或微量移液器吸头被RNase污染,就会导致RNA产量减少或降解。在实验过程中应采取预防措施以避免RNase污染,如戴一次性手套以及使用专用于RNA实验的试管及微量移液器吸头。
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