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□ 酶浓度
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500 mU/ml
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□ 制品形态: 溶液
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组成：20 mM磷酸钠缓冲液pH7.2，50 mM EDTA，0.05% NaN3溶液。
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□ 添附Buffer
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A. Denature buffer :
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1% SDS/1 M Tris-HCl (pH 8.6)
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500 μl
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B. Native buffer :
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1M Tris-HCl (pH 8.6)
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500 μl
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C. Stabilizer solution :
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5% NP-40
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500 μl
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D. Control glycoprotein:
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10 mg/ml Bovine Fetuin
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10 μl
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■ 制品说明
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特异性切断糖蛋白或糖肽的N- 糖苷键 (GlcNAc-Asn)。不能作用于还原末端GlcNAc 与Fucosidic 以α-1,3 键结合的糖链。
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■ 保存
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-20℃，融化后4℃保存，避免反复冻融。
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■ 酶名称
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Peptide-N4-(N-acetyl-β-glucosaminyl) asparagine amidases
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■ 起源
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Escherichia coli carrying the plasmid containing Glycopeptidase F gene.
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■ 底物特异性
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特异性切断糖蛋白或糖肽的N-糖苷键(GlcNAc-Asn)。不能作用于还原末端GlcNAc与Fucosidic以α-1,3键结合的糖链。
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■ 活性定义
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在37℃，pH8.5条件下，每分钟水解1 μmol dansyl fetuin glycopeptide所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。
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■ 特性
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◇ 分子量：约36,500 (SDS-PAGE)
(注) 取决于宿主菌的蛋白水解酶活性，在重组体GPF的氨基末端有15-18个额外的氨基酸残基 (1)。使用RNase B和Fetuin作为底物，作用于蛋白的活性与天然体的GPF是一样的。
◇ 最适pH：pH8.6
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■ 方法
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GPF作用糖蛋白有2种脱-N-糖基化方法，非变性条件和变性条件。根据实验的目的选择适合的条件。
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■ 样品
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样品的溶液浓度应低于50 mM。如果高于50 mM，通过适当的方法使溶液浓度低于50 mM (例如透析)，也可以加酸或碱调整pH值接近8.6 (GPF最适pH)。当样品加入到溶液中时，建议检测pH。 样品中不可含有柠檬酸缓冲液和尿素。
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