□ 比活性
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> 16 U/mg protein (无Co2+)
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> 80 U/mg protein (20 μM Co2+)
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□ 制品形态: 酶在500 μl 下述溶液中的冻干品
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Tris-HCl (pH 8.0)
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50 mM
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■ 制品说明
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Pfu Aminopeptidase I 是外切型氨肽酶,以外切形式从蛋白质和肽的N末端上水解释放氨基酸。具有广泛的底物特异性。该酶不能水解脯氨酸氨基侧的肽键 (X-Proline)。Co2+能显著提高本酶活性。
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■ 保存
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4℃或4℃以下保存 (干燥状态)。
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■ 起源
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Escherichia coli carrying plasmids encoding the Pyrococcus furiosus aminopeptidase I gene.
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■ 反应性
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以外切形式从蛋白质和肽的N末端上水解释放氨基酸。
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■ 活性定义
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在75℃,pH 8.0 的条件下,1分钟水解1 μmol 的Leucine-p-nitroanilide所需要的酶量定义为1个活性单位 (U)。
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■ 特性
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分子量:37,438 (氨基酸分析)
36,000 – 37,000 (SDS-PAGE)
等电点:4.6 - 4.65
抑制剂:EDTA (完全抑制浓度:0.1 mM)
最佳pH:pH5.5 - 6.0 (无 Co2+,90℃)
pH5.5 - 8.0 (20 μM Co2+,90℃)
最佳温度:80℃ (无 Co2+,pH6.0)
95℃ (20 μM Co2+,pH6.0)
热稳定性:酶在90℃ (pH8.0,无Co2+) 保温4小时后保留有65%的活性。
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■ 注意事项
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本酶不能作用于具有高级结构的蛋白质,蛋白质样品需进行CM化等的化学方法变性处理。该酶对PVDF膜上的蛋白质不作用。
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